Bacillus subtilis ATCC 6633中糖基转移酶基因的克隆表达及酶学研究  

作　　者：王倩倩[1] 许家琪 徐益祥 张剑[1] 

机构地区：[1]中国药科大学 江苏省中药评价与转化重点实验室,江苏 南京 211198

出　　处：《中国科技期刊数据库 医药》2017年第2期00197-00198,共2页

摘　　要：[目的]本文主要研究Bacillus subtilis ATCC 6633中起糖基化作用的糖基转移酶基因。[方法]根据转录组测序结果,得到一个假定的糖基转移酶基因BsGT1399,这个基因包含1161个核苷酸,采用PCR扩增BsGT1399基因片段。将获得的片段连接于pET28a的载体上,转化到BL21的感受态细胞中,用生物化学方法对重组酶的活性进行分析。[结果]用SDS-PAGE测定其相对分子质量为43.6KDa。该酶具有糖基化槲皮素的能力,以槲皮素为底物时Km=196μm,Vmax=42μm/min,反应最适温度为40℃,最适pH值为8.5。[结论] BsGT1399基因克隆表达,并且纯化后,具有很强的催化槲皮素转化为异槲皮苷的能力。

关 键 词：糖基转移酶 Bacillus SUBTILIS ATCC 6633 克隆 酶活分析 

分 类 号：TQ4[化学工程] TS2[轻工技术与工程—食品科学与工程]