应用生物膜干涉技术检测抗IgE抗体与IgE亲和力的方法建立  

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作  者:黄峥 夏海峰 郑琛 

机构地区:[1]武汉大学药学院,湖北 武汉 430072 [2]上海泰因生物技术有限公司,上海 201499

出  处:《中国科技期刊数据库 医药》2019年第8期00188-00189,共2页

摘  要:利用生物膜干涉技术检测抗原抗体之间的动力学过程能够更加真实的有效的反应两者之间的结合解离过程。本研究利用链亲和霉素传感器(SA,Streptavidin biosenor)偶联Biotin-IgE检测自制重组人源化抗IgE单克隆抗体与IgE的动力学反应,从而得到亲和力参数KD值。同时通过优化再生条件、固化抗原浓度、抗体浓度和结合解离时间,以获得高准确度及高重现性。最终确定Biotin-IgE的浓度为4 mg/L,抗体浓度在1.25到20 nm之间时,一次性使用SA传感器条件下,其准确性高其中拟合曲线x2小于0.1,R2大于0.95。最后,检测自制单抗与IgE的解离平衡常数KD为0.298 nM与奥马珠单抗(omalizumab)KD 0.459 nM数量级一致,亲和力无明显差异。

关 键 词:生物膜干涉技术(BLI Bio-layer Interferometry) 抗IgE单克隆抗体 亲和力 奥马珠单抗(omalizumab) 

分 类 号:R47[医药卫生—护理学]

 

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