免疫共沉淀验证HBx蛋白与ALDOA、ALDOB和ALDOC相互作用  

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作  者:王卫红 

机构地区:[1]济宁市疾病预防控制中心检验科,山东济宁272000

出  处:《中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生》2021年第3期77-78,共2页

摘  要:目的;利用免疫共沉淀技术验证乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与醛缩酶A(ALDOA)、ALDOB和ALDOC之间在肝细胞内存在直接相互作用。方法;利用脂质体法将含HBx;编码基因的FLAG标签真核表达载体pFLAG-CMV-2-HBx转染Huh7肝癌细胞;48h后裂解细胞;进行免疫共沉淀实验(CO-IP);并通过Western;blot检测免疫沉淀复合物确定HBx蛋白与肝细胞内源性ALDOA、ALDOB和ALDOC存在直接相互作用。结果;用Anit-FLAG抗体对细胞裂解液进行免疫沉淀实验;FLAG-HBx蛋白可以将ALDOA、ALDOB和ALDOC分别沉淀;用Anit-ALDOA、Anit-ALDOB和Anit-ALDOC抗体分别进行免疫沉淀实验;ALDOA、ALDOB和ALDOC均能将FLAG-HBx蛋白沉淀。结论;HBx蛋白与ALDOA、ALDOB和ALDOC在肝细胞内均存在直接相互作用;为进一步研究HBx蛋白的致病机制奠定基础;为阐述醛缩酶在乙型肝炎病毒相关肝癌过程发挥的作用提供依据。

关 键 词:HBX蛋白 ALDOA ALDOB ALDOC 免疫共沉淀 

分 类 号:R473[医药卫生—护理学]

 

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