免疫增效型抗前列腺癌DNA疫苗的构建及表达验证  

作　　者：王伟 崔钦书 张元浩 李金华 董金凯 

机构地区：[1]联勤保障部队第九八四医院普通外科,北京100094 [2]解放军总医院第五医学中心泌尿外科,北京100071

出　　处：《中国科技期刊数据库 医药》2021年第9期00128-00134,共7页

摘　　要：将前列腺干细胞抗原(PSCA)和免疫佐剂IL-12共同构建到同一真核表达载体中,从而构建成一种新型的抗前列腺癌DNA疫苗pVAX1-mPSCA-IRES-mIL-12。方法:将PCR方法扩增的mIL-12基因其克隆到pVAX1-IRES载体中IRES序列的下游构建免疫增效载体pVAX1-IRES-mIL-12,在此基础上将利用RT-PCR方法从RM-1细胞系中扩增的mPSCA基因克隆到该质粒IRES序列的上游,构建前列腺癌DNA疫苗pVAX1-mPSCA-IRES-mIL-12。质粒体外转染293T细胞后分别通过Western Blot验证mPSCA的表达,ELISA法验证mIL-12的真核表达;电穿孔法递送质粒到小鼠体内验,分别验证mPSCA和mIL-12的活体内的表达。结果:酶切及测序结果证实成功构建了pVAX1-IRES-mIL-12、pVAX1-mPSCA和pVAX1-mPSCA-IRES-mIL-12质粒,并且证实了各个质粒的体外和体内可以有效表达。结论:本研究在疫苗的构建、靶抗原的选择、佐剂的应用、DNA递送方式等方面为DNA疫苗的免疫增效做出了新的尝试,所构建的新型DNA疫苗pVAX1-mPSCA-IRES-mIL-12有望为前列腺癌的免疫治疗提供一种新的策略。

关 键 词：PSCA IL-12 DNA疫苗 前列腺癌 免疫治疗 

分 类 号：R273[医药卫生—中西医结合]