重组人胰岛素在大肠杆菌中表达及分离纯化  

作　　者：董美伶 

机构地区：[1]正大天晴药业集团股份有限公司,江苏连云港222062

出　　处：《中国科技期刊数据库 医药》2023年第7期1-4,共4页

摘　　要：胰岛素是一种由胰岛细胞分泌的多肽激素,能够调节血糖水平。重组人胰岛素在大肠杆菌中的表达和分离纯化是一项常见的技术,已经被广泛应用于制备大量高纯度的重组人胰岛素。本研究旨在介绍利用大肠杆菌表达系统表达和分离纯化重组人胰岛素的方法及相关技术纯化,以及其在临床应用中的优缺点和研究展望。首先需要构建表达载体,重组质粒pET28a-ins该质粒含有人胰岛素基因序列,然后将pET28a-ins转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在IPTG诱导下进行表达重组人胰岛素。接下来,通过培养大肠杆菌、细胞破碎、亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等一系列的技术分离纯化重组人胰岛素。最后利用SDS-PAGE和Western blot技术验证重组人胰岛素的纯度和活性到重组人胰岛素。这项工作为重组人胰岛素的大规模生产和临床以及相关的药物研究和生物学研究提供了重要的基础。

关 键 词：胰岛素 重组蛋白 大肠杆菌 表达 分离纯化 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学] R94[医药卫生—药剂学]