Smad通路在BMP-2诱导的牙髓干细胞分化中的应用效果  

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作  者:王晔[1] 于淼[1] 张丞 魏松 

机构地区:[1]保定市第二医院口腔科,河北保定071000

出  处:《中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生》2023年第7期0023-0026,共4页

基  金:保定市科技计划项目,课题编号:2141ZF014。

摘  要:探究Smad通路在BMP-2诱导的牙髓干细胞分化中的应用效果。方法 将人牙髓干细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,每2d,进行一次培养基更换。待细胞融合度达到90%时,0.25%胰蛋白酶消化、传代。取第3代对数生长期的人牙髓干细胞,应用DMEM培养基,将细胞重悬,接种于24孔板,细胞密度为3×104/孔,置于培养箱中培养。当细胞密度约为80%时,将细胞随机分为对照组、单纯诱导组、抑制剂组。对照组细胞不做任何处理,单纯诱导组细胞用浓度为100ng/mL的BMP-2诱导液(BMP-2溶于DMEM培养基)培养,抑制剂组细胞先用200nmol/L的LDN-193189处理24h后,弃去原有培养液,更换为BMP-2诱导液。培养21d后,CCK-8法检测人牙髓干细胞活性;RT-PCR法检测DMP1和DSPPmRNA相对表达量;ALP活性检测;茜素红染色观察矿化结节情况;蛋白印迹法检测BMP-2、p-Smad1/5蛋白相对表达量。结果 与对照组比较,单纯诱导组细胞BMP-2、Runx2、DSPP、BSPmRNA表达水平及p-ERK1/2/ERK1/2、p-Smad1/5/8/Smad1/5/8、Runx2、DSPP、BSP蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与单纯诱导组比较,抑制剂组除BMP-2mRNA表达无显著差异(P>0.05)外,其余上述指标显著降低(P<0.05)。结论 Smad通路在BMP-2诱导的牙髓干细胞分化中处于激活、活化状态,具有关键作用。

关 键 词:SMAD通路 BMP-2诱导 牙髓干细胞分化 

分 类 号:R285[医药卫生—中药学]

 

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