肝癌靶标GPC3纳米抗体在毕赤酵母表达系统的表达及鉴定  

作　　者：覃永康 杨原隆 黄声强 张筱晨 

机构地区：[1]广西科技大学,广西柳州545616

出　　处：《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》2023年第9期84-89,共6页

基　　金：大学生创新创业训练计划(202210594054)。

摘　　要：通过基因克隆技术构建重组毕赤酵母表达系统,探究GPC3纳米抗体在毕赤酵母的表达情况,为GPC3纳米抗体药物在肿瘤靶向诊治方面的应用提供基础。将GPC3纳米抗体基因插入pPICZα表达载体,构建重组质粒。用电转化的方法将线性化的重组质粒转入野生型毕赤酵母X33,筛选鉴定阳性重组子。优化阳性重组子诱导蛋白表达的条件:诱导时间、诱导温度、诱导剂甲醇浓度,探索蛋白最佳表达条件。SDS-PAGE检测上清液蛋白表达情况,实验结果显示,阳性重组菌株用终浓度为1%的甲醇,在26℃下诱导144h纳米抗体表达量最高。成功获得分泌表达GPC3纳米抗体的毕赤酵母,获得分子量为17 kDa的GPC3纳米抗体。为酵母系统工业化生产GPC3纳米抗体提供理论支持,也为进一步研究GPC3纳米抗体靶向药物治疗肝癌提供物质基础。

关 键 词：肝细胞癌 硫酸乙酰肝素蛋白聚糖 纳米抗体 毕赤酵母表达系统 

分 类 号：R9[医药卫生—药学]