全柱成像等电聚焦毛细管电泳法对双特异性Fc融合蛋白的电荷异质性分析  

作　　者：袁国刚 罗顺 林军 林康 昌根琼 

机构地区：[1]江西中医药大学,江西南昌330004 [2]长三角药物高等研究院,江苏南通226133 [3]澳斯康生物(南通)股份有限公司,江苏南通226133

出　　处：《中国科技期刊数据库 医药》2024年第3期0129-0132,共4页

摘　　要：建立全柱成像等电聚焦毛细管电泳(WCID-CIEF)分析双特异性Fc融合蛋白电荷异质性方法。方法 通过非还原毛细管电泳法观察酶处理前后峰型的变化,初步确认了该Fc融合蛋白电荷异质性唾液酸相关;结合唾液酸酶酶切和方法优化手段,建立了此融合蛋白的WCID-CIEF分析平台;通过液相质谱法(LC-MS)鉴定了唾液酸相关N-糖构型;通过液相荧光法(LC-FLR)测定了唾液酸的含量。结果 经唾液酸酶酶切和方法优化后,此方法在2.5~7.5 mgmL-1浓度范围内线性良好,R2=0.998,回收率在96.3%~104.6%之间,准确性、专属性和耐用性均满足要求。结论 结合酶处理和方法优化手段,WCID-CIEF可较好地分析融合蛋白的电荷异质性,提供了一种简单、有效的融合蛋白质控手段,并可应用于产品放行及稳定性监测。

关 键 词：全柱成像等电聚焦毛细管电泳法 双特异性Fc融合蛋白 唾液酸酶酶切 方法开发和确认 

分 类 号：R917[医药卫生—药物分析学]