甲基汞诱导海马神经细胞凋亡及其机制研究  

Apoptosis of Hippocampal Neurons Induced by Methylmercury in Rats

作　　者：李爱[1] 陈雷[2] 胡新武[1] 张亮品[1] 曹雪红[1] 刘烈炬[1] 刘长金[1] 

机构地区：[1]华中科技大学同济医学院生理系,湖北武汉430030 [2]华中科技大学同济医学院药理系,湖北武汉430030

出　　处：《环境与健康杂志》2008年第1期18-21,95,共5页Journal of Environment and Health

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30271500;30571537)

摘　　要：目的研究甲基汞对海马神经元的损伤及致凋亡作用,并初步探讨甲基汞神经毒性的机制。方法以5d内新生SD大鼠海马神经元为实验对象,用四甲基偶氮唑盐(MMT)法检测甲基汞对培养的海马神经细胞活性的影响,原位末端标记(TUNEL)法和流式AnnexinV-FITC-PI法检测甲基汞诱导海马细胞凋亡细胞数和凋亡百分率,并用激光共聚焦技术,从单个细胞水平检测甲基汞对胞内游离Ca2+瞬间动态变化的影响。结果MMT法显示,0.1μmol/L甲基汞作用24h对培养的海马神经细胞杀伤率为(22.90±2.77)%(n=7)。TUNEL法显示,0.1μmol/L甲基汞作用24h组海马神经元凋亡指数[(34.45±1.30)%,n=10]高于溶剂对照组[(6.01±0.64)%,n=10],差异有统计学意义(P<0.01)。流式AnnexinV-FITC-PI法显示,0.1μmol/L甲基汞作用24h诱导海马神经细胞凋亡率为(51.20±4.98)%(n=5)。即时染毒0.01、0.1、1μmol/L甲基汞,使海马神经元细胞内游离钙离子浓度分别增加(5.58±2.37)%(n=5),(82.71±20.42)%(n=4)和(246.38±64.77)%(n=4)。预孵育硝苯的平可延缓甲基汞升钙作用的起效时间并降低胞内钙离子浓度增加的幅值。结论甲基汞对培养的海马神经细胞的急剧升钙作用可能参与了甲基汞的致细胞损伤和诱导凋亡作用,并且可能与细胞膜上的电压门控钙通道有关。Objective To study the hippocampal neurons damage and apoptosis induced by methylmercury in rats and to know the potential mechanism of neurotoxicity of methylmercury. Methods The cell viability was measured by MTT (thiazolyl blue). The number of apoptotic cells and apoptotic rate of neurons were measured by terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) mediated dUTP-biotin nick end-labeling (TUNEL) method and flow cytometry. In addition, laser scanning confocal microscope was used to test the change of intra...

关 键 词：汞 甲基汞化合物 神经元 凋亡 细胞内游离钙 

分 类 号：R114[医药卫生—卫生毒理学]