蚓激酶重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LK^R的构建及其在奶牛乳腺组织中的表达  

作　　者：周兴[1] 张居农[1] 

机构地区：[1]石河子大学动物科学技术学院,石河子832003

出　　处：《中国奶牛》2007年第S1期116-119,共4页China Dairy Cattle

基　　金：国家"863"高技术研究发展计划(No.2002AA206653)基金资助。

摘　　要：构建含有蚓激酶基因(Lumbrokinase,LK)cDNA的重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LK^R,以200μg、500μg、1000μg、2 000μg的剂量梯度注入泌乳期黑白花奶牛乳腺,转染泌乳期奶牛乳腺组织获得暂时表达,并以500μg为最佳表达剂量。利用脂质体转染PA317包装细胞,通过G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后收集病毒上清感染NIH_3T_3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×10~4CFU/mL。再用收获的病毒上清转染妊娠期奶牛乳腺组织,产后奶样经FAPA法检测蚓激酶活性,结果表明牛奶具有明显的纤溶活性,即蚓激酶基因已经整合到奶牛乳腺组织并能实现相对稳定的表达。

关 键 词：蚓激酶 重组逆转录病毒 包装 转染 表达 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]