抗人乙酰胆碱受体单链抗体1956#在大肠杆菌中的可溶性表达  

作　　者：宋琛[1] 徐江[1] 张芳琳[2] 白文涛[2] 李柱一[1] 

机构地区：[1]第四军医大学唐都医院神经内科,陕西西安710038 [2]第四军医大学基础部病原生物学教研室,陕西西安710032

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第3期292-294,297,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30570641)

摘　　要：目的:重组表达抗人乙酰胆碱受体(AChR)单链抗体(scFv)1956#,提高scFv1956#的可溶性表达量。方法:用PCR扩增含抗人AChR scFv1956#的载体pHEN1中的scFv1956#结构基因,并将其插入到原核表达载体pET44a(+)。用重新构建的载体转化E.coli BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。用SDS-PAGE来比较更换载体及不同温度和时间对可溶性表达量的影响,并通过Western blot进行鉴定。结果:PCR产物大小为785bp,与预计相符;所构建质粒经测序证实scFv1956#核苷酸序列正确,并正确插入载体pET44a(+)。诱导后得到的可溶性表达量优于原载体pHEN1。结论:载体pET44a(+)表达的端融蛋白NusA可以帮助scFv1956#的正确折叠,从而获得大量可溶性表达。低温长时间诱导有助于提高可溶性表达的量。

关 键 词：重症肌无力 乙酰胆碱受体 单链抗体 NUSA 

分 类 号：R392[医药卫生—免疫学]