SIVp27单克隆抗体的制备和鉴定  

Preparation and characterization of the monoclonal antibody against SIV p27 antigen

作　　者：孙敏[1] 涂新明[1] 魏强[1] 丛喆[1] 蒋虹[1] 佟巍[1] 陈颂 赖春晖 于浩[1] 秦川[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院实验动物研究所中国协和医科大学实验动物学部,北京100021

出　　处：《中国实验动物学报》2005年第S1期45-,共1页Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica

摘　　要：[目的]建立SIVp27杂交瘤细胞株,并对其分泌的SIVp27单克隆抗体进行初步鉴定。[方法]使用基因重组的SIVp27蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术使用半固体培养基法建立杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体。通过染色体核型对杂交瘤细胞株进行鉴定;采用Westernblot、免疫荧光法、酶联免疫吸附法确定单克隆抗体的交叉反应性、相对亲和力、抗原识别表位、免疫球蛋白的类型和亚类,对单克隆抗体进行鉴定。[结果]获得四株可稳定分泌SIVp27单克隆抗体的杂交瘤细胞,1C3、2B6为IgG1类,2E12为IgG2b类,3G3为IgG2a类。四株单抗均能识别SIV的p27蛋白,与逆转录病毒SRV、STLV无交叉反应,2B6、2E12与HIVp24有交叉反应。免疫荧光法检测腹水效价为1:10240~40960。1C3、2B6、2E12、3G3染色体平均数分别为103、97、96、101。2E12与3G3识别不同的抗原表位。[结论]成功地制备出四株SIVp27单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立免疫分析方法,进行SIV/SAIDS及其艾滋病相关研究,奠定了基础。[Objectives] (1)To establish SIV p27 hybridoma cell lines. (2) To perform elementary identification of monoclonal antibody(McAb). [Method] BALB/c mice were immunized with recombinant SIV p27 protein. Hybridoma cell lines were set up by using hybridoma technique and semisolid culture medium, then monoclonal antibody were prepared. The hybridoma cell lines were identified by analyzing their chromosome; the monoclonal antibody was identified by determining their cross-reactivity, relative affinity, antigenic e...

关 键 词：猴免疫缺陷病毒(SIV) P27蛋白 杂交瘤 单克隆抗体 

分 类 号：Q813.2[生物学—生物工程]