人凝血因子X单克隆抗体的研制及鉴定  

Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies to Human Coagulation Factor X

作　　者：林方昭[1] 肖小璞[1] 黄淑[1] 周昌华[1] 肖玲[1] 周宇[1] 赵青蓉[1] 李湘[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院

出　　处：《四川大学学报（自然科学版）》2002年第S1期160-165,共6页Journal of Sichuan University(Natural Science Edition)

摘　　要：目的　用于提取高纯度凝血因子X(FX)和制备缺乏FX血浆 ,以及建立FX抗原的ELISA检测方法等 .方法　用较高纯度的FX免疫Balb/C小鼠 ,经过 2次基础免疫 ,1次加强免疫 ,3d后取其脾细胞与骨髓瘤SP2 /0 Ag14细胞在PEG作用下进行细胞融合 ,经间接ELISA法筛选杂交瘤细胞株 ,通过免疫印迹试验、交叉反应试验、相加试验和二价金属离子依赖性试验等 ,对单克隆抗体进行鉴定 .结果　经 3～ 4次克隆化后获得了 10株能稳定分泌FX单克隆抗体 (FXMcAb)的杂交瘤细胞株 ,Ig亚类均为IgG1型 ,小鼠腹水效价均在 10 6以上 ,FXMcAb只与FX抗原起特异性反应 ,FXMcAb与FX抗原的结合不同程度地依赖于二价金属离子Zn2 + .结论　所筛选出的FXMcAb为高纯度FX的提取和缺乏FX血浆的制备以及FX抗原的ELISA检测方法的建立 ,提供了试剂准备 .Objective To prepare high purity coagulation facton X(FX) and FX deficient plasma and to develop ELISA for the human FX antigen.Methods Partially purified preparations of homan FX were used to immunize Balb/C mice by twice basic immunization and one booster immnunization,the speleen cells of these animals were fused with mouse myeloma cell line SP2/0-Ag14 cells. The hybridoma strains were screened by indirect ELISA method. The spectificity analysis was carried by Western-blotting test,Cross-reaction test,...

关 键 词：凝血因子X 抗原 单克隆抗体 杂交瘤细胞 

分 类 号：R392.1[医药卫生—免疫学]