人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定  

Isolation,culture and characterization of human adipose-derived stem cells in vitro

作　　者：兰珊珊[1] 赵自然[1] 李玉新[2] 鲍永利[2] 王淼 张舵[1] 

机构地区：[1]吉林大学第一医院整形外科,吉林长春130021 [2]东北师范大学生命科学学院细胞遗传所,吉林长春130024

出　　处：《吉林大学学报（医学版）》2008年第6期1079-1082,1121,共5页Journal of Jilin University：Medicine Edition

基　　金：国家自然科学基金资助课题(30670563);吉林省科技厅资助课题(20030423-01)

摘　　要：目的:进行人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定,为组织工程的进一步研究提供实验依据。方法:将剪碎的人脂肪组织加入Ⅰ型胶原酶消化,离心。将细胞悬液置于6孔培养板中,37℃、5%CO2培养箱中培养,细胞达80%融合时进行传代。选取第3代细胞,进行免疫组织化学染色,检测细胞表面抗原标记物;选取第3代细胞,分为成骨诱导组和成脂诱导组,每组又分为诱导组(加入相应诱导培养基)及对照组(未经诱导的细胞)。成骨诱导72h后进行碱性磷酸酶(AKP)含量检测,8d后进行茜素红染色,检验细胞内是否出现钙沉积;成脂诱导2周后进行油红O染色,检测细胞内是否形成脂滴。结果:培养细胞均有CD44、CD49d抗原阳性表达,不表达CD45、CD106抗原;成骨诱导72h后,诱导组细胞内AKP含量(0.4883U·g-1prot)较对照组(0.0632U·g-1prot)明显增高(P<0.05);8d后诱导组茜素红染色阳性,对照组阴性;成脂诱导2周后油红O脂肪颗粒染色为阳性,对照组为阴性。结论:利用原代细胞培养技术可成功地从人脂肪组织中分离出脂肪干细胞。

关 键 词：干细胞 细胞分离 细胞培养 

分 类 号：R329[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]