单纯疱疹病毒胸苷激酶多克隆抗体的制备  

Preparation of polyclonal antibody of HSV-TK

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作  者:张煜[1] 于湘辉[1] 查晓[2] 王安荣[3] 孔维[1] 

机构地区:[1]吉林大学疫苗中心,吉林长春130012 [2]四川省肿瘤研究所,四川成都610041 [3]四川省肿瘤医院肿瘤流行病室,四川成都610041

出  处:《吉林大学学报(医学版)》2008年第6期1089-1091,共3页Journal of Jilin University:Medicine Edition

基  金:四川省科技厅应用基础研究项目资助课题(2008JY0020)

摘  要:目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础。方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆入表达载体pRSETB中进行表达,以纯化的表达产物免疫家兔制备多克隆抗血清,进行Western blotting鉴定。结果:用IPTG诱导后,表达出相对分子质量(Mr)约43000的融合蛋白,免疫家兔制备的兔血清,第2~5周每周采血1次,Western blotting检测均获得特异性蛋白带;最后一次样品3个稀释度(1∶1000、1∶3000、1∶5000)的Western blotting分析仍可以检出蛋白质带。结论:成功获得了特异性强和滴度高的HSV-TK多克隆抗体。

关 键 词:单纯疱疹病毒属 胸苷激酶 基因表达 多克隆抗体 

分 类 号:R392[医药卫生—免疫学]

 

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