不同浓度α辅肌动蛋白对体外环境下肌动蛋白聚合-解离平衡的影响  

Study on effects of α-actinin concentration on the balance system of F-actin/G-actin/cross-linking actin in vitro

作　　者：夏育民[1] 张毅[2] 熊腊元[1] 刘小明[1] 

机构地区：[1]武汉大学人民医院皮肤科,湖北武汉430060 [2]三峡大学第三临床学院葛洲坝中心医院内二科,湖北宜昌443002

出　　处：《中国医学工程》2008年第3期164-167,共4页China Medical Engineering

摘　　要：目的构建肌动蛋白的体外聚合-解离反应体系,探讨α辅肌动蛋白浓度对该平衡体系的影响。方法采用改良的Sobieszek-Bremel法和Katalin Pinter法,从人骨骼肌中分别提取α辅肌动蛋白和G肌动蛋白,构建G肌动蛋白/F肌动蛋白/交联态肌动蛋白的聚合-解离反应体系,施加不同浓度的α辅肌动蛋白,并采用SDS-PAGE电泳与荧光显影法检测反应缓冲液中三种肌动蛋白含量的变化。结果本方法可制备高纯度的α辅肌动蛋白与G肌动蛋白;当α辅肌动蛋白浓度处于0～0.40g/L时,交联态肌动蛋白含量随着前者浓度升高而增多,而当前者浓度处于0.40～0.70g/L时,交联态肌动蛋白含量进入平台期;在该反应体系内,F肌动蛋白/G肌动蛋白浓度比值处于0.45～0.59区间。结论在一定范围条件下,适当增加α辅肌动蛋白可以促进F肌动蛋白交联反应,但F肌动蛋白/G肌动蛋白比值基本维持不变。【Objective】To investigate the effect of α-actinin on the balance system of F-actin/G-actin/cross-linking actin established in vitro.【Methods】 The modified Sobieszek-Bremel and Katalin Pinter methods were used respectively to purificate α-actinin and actin from rabbit skeletal muscle.The reaction system of F-actin/G-actin/cross-linking actin was established in vitro with the addition of different concentration of α-actinin.The three proteins was detected by the fluorescent development after SDS-PAGE electrop...

关 键 词：辅肌动蛋白 肌动蛋白 细胞骨架 骨骼肌 

分 类 号：Q51[生物学—生物化学]