PCR-RFLP中Chelex-100制备DNA模板的方法建立及其条件优化  

Optimization of Preparation Condition of DNA Template by Chelex-100 for PCR-RFLP

作　　者：欧阳刚[1] 胡文娟[1] 姚品芳[2] 王红[3] 陈思礼[1] 王朝元[1] 李劲[1] 

机构地区：[1]中南民族大学生命科学学院,武汉430074 [2]湖北省肿瘤医院肿瘤研究所,武汉430079 [3]中南民族大学校医院,武汉430074

出　　处：《中南民族大学学报（自然科学版）》2009年第1期38-41,共4页Journal of South-Central University for Nationalities：Natural Science Edition

基　　金：国家民委自然科学基金资助项目(MZY07004)

摘　　要：目的:建立一种快速、可靠、经济的DNA纯化技术用于分子流行病学调查及群体遗传学的研究.方法:根据MMP3基因外显子2中rs679620的SNP区域(-Lys45Glu-)设计引物,采用Chelex-100法从微量全血中提取人基因组DNA,利用PCR-RFLP对其进行检测,观察基因分型结果.结果表明:取10μL全血,加入200μL 5%Chelex-100溶液,56℃水浴保温30 min后,100℃水浴8 min,离心取上清为最佳用于PCR的DNA模板提取条件.经PCR扩增及酶切验证,其DNA条带特异、清晰,适用于基因分型.结论:提取人基因组DNA的Chelex-100法所需血样微量、操作简单、快速、可靠、经济,特别适合于大量样本的DNA提取,可用于人群分子流行病学调查及群体遗传学的研究.A reliable,economical and large-scale method was established for molecular epidemiology and population genetics investigations.According to the SNP rs679620(-Lys45Glu-) in exon 2 of the MMP3 gene,a pair of primer was designed for PCR.Using the Chelex-100 Method to extract genomic DNA from a micro amount of human whole blood,the genotypes was obtained by PCR-RFLP.The optimized condition is: 10 μL of human whole blood with 200 μL of 5 % Chelex-100 solution in a sample tube was immersed in a 56 ℃ water bath fo...

关 键 词：Chelex-100 基因组DNA提取 基因分型 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]