巴西橡胶树HbHDR的原核表达及HbHDR在乳管细胞中的亚细胞定位  

Expression of HbHDR in E. coli and Sub-cellular Localization of the HbHDR in the Laticifers of Hevea brasiliensis

作　　者：李辉亮[1,2] 雷美玉[1,2] 彭世清[1] 

机构地区：[1]农中业国部热带热带农业作物科生学院物热技带术重生点物开技术放研实究验室所,海口571101 [2]海南大学农学院,海口570228

出　　处：《热带作物学报》2009年第3期327-331,共5页Chinese Journal of Tropical Crops

基　　金：国家自然科学基金项目(No30760203);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目(NoITBBZD0712)资助

摘　　要：4-羟基-3-甲基-2-(E)-丁烯基-4-磷酸还原酶(4-hydroxy-3-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate reductase,HDR)是异戊烯基焦磷酸合成途径之一甲基赤藓糖磷酸(methylerythritol phosphate,MEP)途径中的最后一个酶,催化4-羟基-3-甲基-(2E)-丁烯基-4-磷酸生成异戊烯基焦磷酸。根据笔者从橡胶树中克隆的HDR基因(命名为HbHDR,GenBank登录号:EU881977)序列,构建了HbHDR的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达获得融合表达蛋白。将融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备HbHDR的高效价特异的多克隆抗体。Western-blot分析表明,HbHDR存在于乳管细胞的橡胶粒子和C-乳清中。4-hydroxy-3-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate reductase (HDR) is proved to be the terminalacting enzyme in the plastid MEP pathway which catalyzes the conversion of 4-hydroxy-3-methyl-2-(E)butenyl-4-diphosphate into isoprenoids. HbHDR had been cloned from rubber tree (Hevea brasiliensis). In this experiment, the open reading frame (ORF) of the HbHDR was inserted into pET-28a expression vector to transform E. coli BL21 (DE3). The recombinant protein was produced under a condition of IPTG treatment. The emul...

关 键 词：巴西橡胶树 HbHDR 甲基赤藓糖磷酸途径 原核表达 乳管细胞 

分 类 号：S794.1[农业科学—林木遗传育种]