一品红ISSR反应体系的建立与优化  

Establishment and optimization for ISSR-PCR reaction system in poinsettia

作　　者：苏家乐[1] 姜维华[2] 冯立国[2] 陶俊[2] 

机构地区：[1]江苏省农业科学院园艺研究所,江苏南京210014 [2]扬州大学园艺与植物保护学院,江苏扬州225009

出　　处：《扬州大学学报（农业与生命科学版）》2009年第2期87-90,共4页Journal of Yangzhou University：Agricultural and Life Science Edition

基　　金：国家星火计划项目(2007EA690003);江苏省"十一五"科技攻关项目(BE2006341;BE2007309)

摘　　要：运用L16(45)正交设计对一品红ISSR反应的5个因素(DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、TaqDNA酶浓度)在4个水平上进行优化试验,通过不同反应体系扩增效果比较,建立了优化的一品红ISSR反应体系:50μL的PCR体系中含有DNA模板100 ng、Mg2+2.5 mmol.L-1、dNTPs 0.20 mmol.L-1、引物300 pmol.L-1、TaqDNA聚合酶1.0 U。The orthogonal design was used to optimize ISSR-PCR amplification system on poinsettia(Euphorbia pulcherrima Willd.) in four levels of five factors(the concentration of DNA template,Mg2+,dNTPs,primer and Taq DNA polymerase) respectively.The results showed that the optimal concentration of five important components i.e.template DNA,Mg2+,dNTPs,primer and Taq DNA polymerase in 50 μL ISSR reaction system were 100 ng,2.5,0.20 mmol·L-1,300 pmol·L-1 and 0.2 U,respectively.

关 键 词：一品红 ISSR-PCR 反应体系 优化 

分 类 号：S685.23[农业科学—观赏园艺]