利用抗CTP合成酶反馈抑制筛选胞苷高产突变株  

Screening of cytidine-producing mutants based on feedback-inhibition resistance of CTP synthetase

作　　者：李登奎[1] 徐晓莉[1] 黄雷鸣[1] 陈颖[1] 窦洁[1] 周长林[1] 

机构地区：[1]中国药科大学生命科学与技术学院,南京210009

出　　处：《中国药科大学学报》2009年第5期455-459,共5页Journal of China Pharmaceutical University

基　　金：江苏省自然科学基金资助项目(No.SBK200921231);江苏省高校"青蓝工程";国家大学生创新性实验计划资助项目~~

摘　　要：目的:通过解除对CTP合成酶的反馈抑制,得到胞苷高产突变株。方法:以胞苷脱氨酶缺失的枯草芽孢杆菌为出发菌株进行亚硝基胍(NTG)诱变,用6-氮杂尿嘧啶(6-AU)、5-氟胞苷(5-FCR)和3-脱杂氮尿嘧啶(3-DU)3种嘧啶结构类似物进行抗性筛选。结果:筛选得到突变株K-215,研究表明其抗6-AU、5-FCR和3-DU的浓度分别是0.9mg/mL,3.5mg/mL和4.5mg/mL;突变株CTP合成酶的活性为出发菌株的6.2倍,37℃培养80h积累胞苷可达6.2mg/mL。结论:突变株K-215能够累积胞苷且CTP合成酶的反馈抑制得到部分解除。Aim:To obtain a mutant which could increase the yield of cytidine by decreasing the feedback-inhibition of CTP synthetase.Methods:A cytidine deaminase deficient strain was induced mutation by nitrosoguanidine(NTG)and screened with pyrimidine analogs,to obtain 6-azauracil,5-fluorocytidine and 3-deazauracil resistant strains.Results:A mutant of Bacillus subtilis K-215 was obtained,with the critical resistance concentration to 6-azauracil,5-fluorocytidine and 3-deazauracil being 0.9,3.5 and 4.5 mg/mL,respectiv...

关 键 词：胞苷 CTP合成酶 抗性筛选 枯草芽孢杆菌 

分 类 号：Q93[生物学—微生物学]