立氏立克次体外膜蛋白B基因片段的克隆与表达  

Cloning and expression of the gene fragment encoding Orienlia tsulsugamushi the outer mem brane protein B of Rickettsia rickettsii in E.coli

作　　者：焦艳梅[1] 温博海[1] 牛东升[1] 高宁[1] 余跃飞[1] 陈梅玲[1] 邱玲[1] 

机构地区：[1]军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071

出　　处：《中国人兽共患病学报》2004年第z1期76-,共1页Chinese Journal of Zoonoses

摘　　要：目的立氏立克次体(Rickettsia rickettsii)外膜蛋白B(OmpB)基因(ompB)片段的克隆与表达.方法采用PCR方法,从立氏立克次体基因组中扩增其ompB基因片段,将该基因片段与原核表达载体pQE30连接,构建重组原核表达质粒pQE30/ompB;将pQE30/ompB转入大肠杆菌细胞内,用IPTG诱导转化大肠杆菌表达目的基因.结果获得长为1188bp的ompB基因片段,SDS-PAGE分析发现pQE30/ompB转化菌表达了一44kDa蛋白,该蛋白与立氏立克次体免疫兔血清在免疫印迹分析中呈阳性反应,与其它立克次体免疫血清反应呈阴性,用该重组蛋白免疫血清做间接免疫荧光,检测立氏立克次体结果为阳性,而检测贝氏柯克斯体、恙虫病立克次体和普氏立克次体的结果为阴性.结论 pQE30/ompB转化的大肠杆菌表达了ompB基因片段,所产生的重组蛋白具有立氏立克次体抗原特异性和良好的免疫反应性.

分 类 号：R5[医药卫生—内科学]