微孔板蛋白芯片可视化检测方法的研究  

Visual detection method for microplate protein arrays

作　　者：钟文英[1] 李周敏[1] 许丹科[2] 

机构地区：[1]中国药科大学分析化学教研室药物质量与安全预警教育部重点实验室,南京210009 [2]南京大学化学化工学院,南京210093

出　　处：《分析试验室》2010年第5期5-8,共4页Chinese Journal of Analysis Laboratory

基　　金：国家重点基础研究发展计划(973;2006CB910803);江苏省"六大人才高峰"项目;国家科技部863项目(2009AA043701);蛋白质组学国家重点实验室开发课题项目资助

摘　　要：将微孔板生物芯片制备技术与银增强显色方法相结合,建立了一种高通量蛋白免疫分析新方法。研究采用夹心法反应原理,将人IgG捕获抗体以微阵列形式点样于96孔板底部制备成蛋白微阵列,并依次与人IgG、生物素标记二抗及链亲和素胶体金反应,最后用银增强法显色。采用平板式扫描仪对微孔板显色结果进行快速扫描成像,图像采用luxscan 3.0软件处理。结果表明:微孔板蛋白芯片的最低检测量可达0.6 ng/mL,线性范围10 ng/mL^100μg/mL,相关系数为0.98,重复性较好(CV<10%)。A logical progression of the widely used microliter plate ELISA is toward a protein array format that allows simultaneous detection of multiple analytes at multiple array addresses within a single well.In this report,a visual detection method based on silver enhancement was developed to establish a high-throughput protein immunoassay new approach.Sandwich detection of silver enhancement method was developed to fabricate and assay for human IgG arrays.On the base of sandwich detection model,the capture antib...

关 键 词：微孔板 蛋白芯片 夹心法 银增强检测 

分 类 号：Q503[生物学—生物化学]