拟南芥miR395d基因的克隆和过表达载体构建及其在油菜中的转化  

Cloning of pre-miR395d gene from Arabidopsis thaliana and construction of gene over-expression vector and transformation to Brassica napus

作　　者：张芸[1] 李会[1] 车丽玲[1] 黄思齐[1] 邱承祥[1] 杨志敏[1] 

机构地区：[1]南京农业大学生命科学学院,江苏南京210095

出　　处：《南京农业大学学报》2010年第2期25-29,共5页Journal of Nanjing Agricultural University

基　　金：国家自然科学基金项目(30671249);江苏省自然科学基金项目(BK2006137)

摘　　要：MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性长度约为21～24个核苷酸,在基因表达、生长发育、细胞周期及环境胁迫等方面起着重要作用的单链非编码小分子RNA。研究表明:植物miRNAs通过转录后以切割的方式对其靶基因的表达起着负调控作用。miR395的靶基因分别为ATP硫酸化酶和硫转运体SULTR2;1,两者在硫同化及转运中起着重要的作用。为了进一步探究miR395的功能,本研究利用PCR法从拟南芥中克隆了miR395d前体基因,并与pCAMBIA1304载体连接,构建了miR395d前体基因的过量表达载体,通过根癌农杆菌介导法将其转化到甘蓝型油菜特选4号中,目前已获得了转基因植株。MicroRNAs(miRNAs)are endogenous 2124 nucleotide single-stranded RNAs and play important roles in gene expression,development,cell cycles and environmental stress.Plant miRNAs down-regulate the abundance of their target mRNAs by post-transcription cleavage.miR395 plays an important role in sulphate assimilation and allocation via adjusting the expression of ATP sulphurylase(APS)and a sulphate transporter(SULTR2;1).In order to explore the function of miR395 in sulphate assimilation and allocation,the pre-miR3...

关 键 词：miR395d前体 ATP硫酸化酶 硫转运体SULTR2 1 过表达载体 转基因 

分 类 号：S565.4[农业科学—作物学]