牛诱导性多能干细胞向心肌细胞的诱导分化  

Induced differentiation of cardiomyocytes from bovine induced pluripotent stem cells

作　　者：陈冬梅[1] 吕长荣[1] 辛晓玲[1,2] 窦忠英[1] 

机构地区：[1]西北农林科技大学动物医学院陕西省农业分子生物学重点实验室国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心,陕西杨凌712100 [2]河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南郑州450002

出　　处：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2010年第10期1-6,共6页Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition)

基　　金：国家自然科学基金项目(30671067);陕西省重大科技项目(2006KZ05-G1)

摘　　要：【目的】研究牛诱导性多能干细胞(Bovine induced pluripotent stem cells,biPSCs)向心肌细胞的分化能力。【方法】将biPSCs悬浮培养制备类胚体,采用类胚体介导体外自由分化与定向诱导分化(添加RA、DMSO和RA+DMSO3种诱导物)的方法,使biPSCs在体外分化,比较了biPSCs在3种不同心肌诱导条件下定向分化为心肌细胞的诱导效率;分别提取biPSCs、类胚体及不同诱导体系分化细胞的总RNA,用RT-PCR检测心肌细胞发育标志基因的表达。【结果】biPSCs在悬浮条件下培养7d,能够形成典型球形和囊腔样类胚体。类胚体再贴壁培养7d,经过免疫细胞化学检测,贴壁细胞大量分化为α-actin阳性的心肌样细胞。在体外诱导分化体系中,RA+DMSO共同诱导的效率较RA和DMSO单独诱导显著增高(P<0.05)。RT-PCR结果显示,各组分化后的细胞中心肌细胞发育特异性基因ACTA2与GATA4均有高水平表达。【结论】biPSCs在体外悬浮培养能够形成类胚体,类胚体贴壁培养后可以分化为α-actin阳性的心肌样细胞;分化形成的心肌样细胞均表达心肌特异性基因。【Objective】The first evidence that bovine iPS cells could be induced to differentiate into cardiomyocytes by RA and DMSOin vitro was reported.【Method】The biPSCs were cultured using the hanging drop and suspension culture method for embryoid body(EBs)formation.Incubation of EBs with RA/MSO and RA+DMSO was used to induce cardiac differentiation.The marker proteins of cardiomyocytes was examined by immunocytochemistry staining.The induction efficiency was compared in three different cardiac induced conditions....

关 键 词：诱导性多能干细胞 细胞分化 心肌细胞 牛 

分 类 号：Q813[生物学—生物工程]