密码子优化的甲型H1N1流感病毒HA/HA1基因真核载体的构建及初步表达  

Construction and primary expression of eukaryotic expressing vectors of codon-optimized H1N1 influenza virus HAand HA1 gene

作　　者：李捧花[1] 张晓光[2] 王晶钰[1] 马晶[2] 张晓梅[2] 

机构地区：[1]西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100 [2]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤病毒室,北京100052

出　　处：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2010年第11期7-13,共7页Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition)

基　　金：国家"十一五"科技支撑计划项目(2006BAD06A15)

摘　　要：【目的】构建甲型流感病毒H1N1血凝素基因HA/HA1的真核表达载体,并检测其在BHK-21细胞中的表达。【方法】按照人的偏爱密码子,对H1N1流感病毒的HA/HA1基因进行优化改造,以提高其表达量,经全基因合成后插入到真核表达载体pSNAV中,构建了真核表达质粒pSNAV-Mod. HA与pSNAV-Mod. HA1;质粒转染BHK-21细胞,G418筛选后,用免疫荧光及Western blot技术检测其表达情况。【结果】成功构建了血凝素基因HA/HA1的真核表达载体。经G418筛选得到单克隆,免疫荧光技术和Western blot检测10代,显示Mod. HA和Mod. HA1皆可在BHK-21细胞中稳定表达。【结论】成功构建的流感病毒HA和HA1真核表达载体,可为今后开展多基因表达的基因工程疫苗及H1N1检测试剂奠定基础。【Objective】The study was done to construct influenza A virus H1N1-Mod.HAand H1N1 Mod.HA1eukaryotic expressing plasmids and test their expression in BHK-21 cells.【Method】HAand HA1 DNA sequences of H1N1 influenza A virus were optimized in accordance with human codon preference so as to enhance its protein expression in eukaryotic expressing system.Synthetic HAand HA1 genes were inserted into the eukaryotic expressing vector pSNAV,which constructed Eukaryotic Expressing Plasmids of Mod.HA and Mod.HA1. Mod.HAan...

关 键 词：流感病毒 HA基因 HA1基因 密码子优化 真核表达 

分 类 号：R373.1[医药卫生—病原生物学]