空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因的克隆表达  

Construction of the prokaryotic express vector of cjaA gene of campylobacter jejuni

作　　者：邢丛丛[1] 李震中[1] 白欣立[2] 徐飞[3] 简朔 李鑫[1] 赵子春[1] 高爱民[1] 薛峰[3] 

机构地区：[1]河北医科大学第二医院神经内科,石家庄050000 [2]河北医科大学第二医院儿科,石家庄050000 [3]江苏出入境检疫局动植物与食品检测中心 [4]厦门大学医学院

出　　处：《脑与神经疾病杂志》2011年第2期81-84,共4页Journal of Brain and Nervous Diseases

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30471919);国家高技术研究发展计划(2006AA02A208);(863计划2006AA02A2080)

摘　　要：目的克隆空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建其原核表达载体,诱导表达及纯化蛋白,为基因工程疫苗的研制打下基础。方法扩增空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建pGEM-T-cjaA克隆载体,以EcoRI和XhoI为酶切位点构建pGEX-4T-1-cjaA原核表达载体。表达载体转化E.coli BL21后诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物,用Glutathione Sepharose4B纯化重组蛋白。结果成功构建pGEX-4T-1-cjaA表达载体,并获得浓度为10μg/μl的rGST-CjaA重组蛋白。结论成功构建pGEM-T-cjaA克隆载体及pGEX-4T-1-cjaA表达载体,获得重组蛋白rGST-CjaA,为研究空肠弯曲菌疫苗打下基础。Objective To construct prokaryotic expression vector carrying campylobacter.jejuni penner o:19 cjaA gene,express it in E.coli and purify protein.Methods The cjaA gene were amplified by PCR.The clone vector pGEM-T and expression vector pGEX-4T-1 with inserted cjaA gene were constructed.The target protein was expressed in E.coli BL21.The protein was identified and analyzed by SDS-PAGE.The target protein was purified by Glutathione Sepharose4B.Results Constructed the expression vector pGEX-4T-1-cjaA,purified t...

关 键 词：空肠弯曲菌 cjaA基因 原核表达 载体构建 蛋白纯化 

分 类 号：R378[医药卫生—病原生物学]