Hsp22对缺氧/复氧损伤人脐静脉内皮细胞保护及Bcl-2、Caspase-3的表达  

Hsp22 protect anoxia/reoxygenation injured HUVECs and regulate the expression of Bcl-2 and Caspase-3

作　　者：刘江[1] 吴延庆[1] 陈琦[1] 龚韧[1] 

机构地区：[1]南昌大学第二附属医院,南昌330006

出　　处：《岭南心血管病杂志》2011年第S1期191-192,共2页South China Journal of Cardiovascular Diseases

摘　　要：目的研究热休克蛋白22(Heat shock protein22,Hsp22)对缺氧/复氧损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)保护作用,并探讨Hsp22调节bcl-2和caspase-3表达。方法把pGcsi-U6/Neo/GFp/shRNA/HSP22稳定转染HUVECs,Western blot印迹检测Hsp22蛋白在对照组、Lipo组、未转染组和转染组缺氧24 h/复氧0 h表达;MTT检测转染组和未转染组缺氧24 h/复氧0 h、3 h、6 h、12 h生长抑制:RT-PCR和Western blot印迹检测bcl-2和caspase-3转染组和未转染组缺氧24 h/复氧0 h、3 h、6 h、12 h基因和蛋白表达水平。结果 (1)转染组显著低于比对照组、Lipo2000组和未转染组(0.20±0.02 vs.0.43±0.03 vs.0.45±0.06 vs.0.48±0.05,P<0.05)而对照组、Lipo2000组和未转染组组间无显著差异(P>0.05)。(2)转染组抑制高于未转染组相同复氧时间点(58.5%±2.1%vs.41.6%±5.4%、62.7%±5.4%vs.45.6%±3.7%、65.4%±8.4%vs.48.5%±5.2%和68.6±6.7%vs.52.9%±3.4%,P<0.05)。(3)转染组bcl-2基因和蛋白在相同复氧时间点均低于未转染组:(1.85±0.06 vs.2.65±0.15、1.66±0.04 vs.2.35±0.08、1.09±0.05 vs.2.05±0.08、0.69±0.04 vs.1.75±0.09,P<0.05)和(0.54±0.04 vs.1.05±0.05、0.32±0.05 vs.0.75±0.03、0.29±0.02 vs.0.55±0.03、0.13±0.04 vs.0.45±0.07,P<0.05)。(4)转染组caspase-3基因和蛋白在相同复氧时间点均高于未转染组:(2.75±0.04 vs.1.75±0.07、2.96±0.04 vs.1.95±0.06、3.59±0.05 vs.2.45±0.05、3.59±0.05 vs.2.77±0.09,P<0.05)和(9.36±0.11 vs.3.05±0.12、8.82±0.07 vs.2.65±0.12、6.18±0.24 vs.2.05±0.11、3.59±0.05 vs.1.75±0.04,P<0.05)。结论 (1)稳定转染并缺氧/复氧损伤后,转染组Hsp22蛋白表达明显低于对照组而对照组、Lipo组和未转染组组间Hsp22蛋白无显著差异;(2)Hsp22对缺氧/复氧损伤HUVECs起保护作用;(3)Hsp22通过上调bcl-2和下调caspase-3基因和蛋白表达保护受损细胞。目的研究热休克蛋白22(Heat shock protein22,Hsp22)对缺氧/复氧损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)保护作用,并探讨Hsp22调节bcl-2和caspase-3表达。方法把pGcsi-U6/Neo/GFp/shRNA/HSP22稳定转染HUVECs,Western blot印迹检测Hsp22蛋白在对照组、Lipo组、未转染组和转染组缺氧24 h/复氧0 h表达;MTT检测转染组和未转染组缺氧24 h/复氧0 h、3 h、6 h、12 h生长抑制:RT-PCR和Western blot印迹检测bcl-2和caspase-3转染组和未转染组缺氧24 h/复氧0 h、3 h、6 h、12 h基因和蛋白表达水平。结果 (1)转染组显著低于比对照组、Lipo2000组和未转染组(0.20±0.02 vs.0.43±0.03 vs.0.45±0.06 vs.0.48±0.05,P&lt;0.05)而对照组、Lipo2000组和未转染组组间无显著差异(P&gt;0.05)。(2)转染组抑制高于未转染组相同复氧时间点(58.5%±2.1%vs.41.6%±5.4%、62.7%±5.4%vs.45.6%±3.7%、65.4%±8.4%vs.48.5%±5.2%和68.6±6.7%vs.52.9%±3.4%,P&lt;0.05)。(3)转染组bcl-2基因和蛋白在相同复氧时间点均低于未转染组:(1.85±0.06 vs.2.65±0.15、1.66±0.04 vs.2.35±0.08、1.09±0.05 vs.2.05±0.08、0.69±0.04 vs.1.75±0.09,P&lt;0.05)和(0.54±0.04 vs.1.05±0.05、0.32±0.05 vs.0.75±0.03、0.29±0.02 vs.0.55±0.03、0.13±0.04 vs.0.45±0.07,P&lt;0.05)。(4)转染组caspase-3基因和蛋白在相同复氧时间点均高于未转染组:(2.75±0.04 vs.1.75±0.07、2.96±0.04 vs.1.95±0.06、3.59±0.05 vs.2.45±0.05、3.59±0.05 vs.2.77±0.09,P&lt;0.05)和(9.36±0.11 vs.3.05±0.12、8.82±0.07 vs.2.65±0.12、6.18±0.24 vs.2.05±0.11、3.59±0.05 vs.1.75±0.04,P&lt;0.05)。结论 (1)稳定转染并缺氧/复氧损伤后,转染组Hsp22蛋白表达明显低于对照组而对照组、Lipo组和未转染组组间Hsp22蛋白无显著差异;(2)Hsp22对缺氧/复氧损伤HUVECs起保护作用;(3)Hsp22通过上调bcl-2和下调caspase-3基因和蛋白表达保护受损细胞。

关 键 词：复氧损伤 稳定转染 缺氧 人脐静脉内皮细胞 保护作用 显著差异 对照组 基因 热休克蛋白 蛋白表达 

分 类 号：R54[医药卫生—心血管疾病]