基于良好表达框架的全合成人源抗体库的构建方法  

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作  者:王尚资[1] 尹长城[3] 林正红[3] 王祥斌[3] 刘晶[3] 张逸[3] 于文功[1] 管华诗[1] 黄华糅[2] 

机构地区:[1]中国海洋大学海洋药物与食品研究所,青岛266003 [2]《高技术通讯》联系人 [3]中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京100101

出  处:《高技术通讯》2004年第6期32-38,共7页Chinese High Technology Letters

摘  要:构建大容量高质量抗体库,从而提高针对任意抗原的重组抗体的筛出率是一项有意义而又繁琐的工作。本文在现有建库方法的基础上,兼顾操作方法的简便和高质量抗体库的要求,设计了一种易于操作、步骤简洁的建库方法,并通过构建一个中等库容的单骨架全合成单链抗体模式库,验证了该方法的可行性。本工作选用两条表达性能良好,在入抗体库中高频率出现的胚系基因作为抗体库的骨架,以期保证合成库的代表性和良好的表达折叠性能。在可变区的设计上,对重轻链可变区的CDR3区同时进行了随机化。在CDR区随机化合成策略的选择上,采用一种新颖的分组式合成法。本工作为其他骨架或多骨架合成库的构建提供了一种可供参考的构建模式,本抗体库也可用于抗体前导物的筛斌。

关 键 词:合成抗体库 单链抗体 噬菌体展示 噬菌体 克隆效率 表达率 

分 类 号:Q813.2[生物学—生物工程]

 

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