山羊RAPD反应条件的研究  

Study on RAPD Reaction Conditions for Goats

作　　者：陈祥[1] 张勇[1] 李国红[2] 廖正录[3] 简承松[1] 魏泓[4] 

机构地区：[1]贵州大学动物科学院,贵阳550025 [2]贵州师范大学生物系,贵阳550001 [3]贵州省农业厅畜禽品种改良站,贵阳550001 [4]第三军医大学实验动物中心,重庆400038

出　　处：《贵州农业科学》2004年第4期11-13,共3页Guizhou Agricultural Sciences

基　　金：贵州大学校基金 (2 0 0 0 ) ;贵州省科学技术基金 [黔基合计字 (2 0 0 2 ) 30 5号 ];国家自然科学基金 (30 0 70 1 2 0 )资助

摘　　要：以贵州山羊为材料 ,研究了MgCl2 浓度、引物浓度、dNTP浓度、模板DNA用量、TaqDNA聚合酶用量对RAPD反应的影响 ,建立了一套适合山羊的最佳RAPD反应体系。反应总体积为 2 5 μl ,MgCl2 浓度 2 .0mmol/L ,引物为 1 8.75ng ,dNTP浓度 0 .32mmol/L ,模板DNA为 1 5ng ,TaqDNA聚合酶为 2U。PCR反应程序为 :94℃ 3min ;94℃ 1min ,38℃ 1min ,72℃ 2min ,40Cycles ;72℃ 1 0min。In this paper, the effects of concentration of MgCl_(2), random primers,dNTP,template DNA and TaqDNA (polymerase) on RAPD were analyzed with goat.An optimalized RAPD system with total volume 25 μl including MgCl_2 at 2.0 (mmol/L),18.75 ng random primer, dNTP at 0.32 mmol/L,15 ng template DNA and 2U Taq DNA polymerase was set up.The (reaction) program with 3 minutes at 94℃, which is followed by 40 cycles, each with 1 minutes at 94℃, 1 minutes at 38℃, 2 minutes at 72℃,and a final (extension) at 72℃ for 10 minutes.

关 键 词：山羊 RAPD 模板DNA 引物浓度 MgCl2浓度 随机扩增多态DNA 

分 类 号：S827.2[农业科学—畜牧学] Q78[农业科学—畜牧兽医]