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作 者:唐霓[1] 张秉强[1] 闫歌[1] 蒲丹 高小玲[1] Tong-ChuanHe 黄爱龙[1]
机构地区:[1]重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆400010 [2]MolecularOncologyLaboratory,TheUniversityofChicagoMedicalCenter,IL60637,USA
出 处:《科学通报》2004年第12期1145-1150,共6页Chinese Science Bulletin
摘 要:构建针对乙型肝炎病毒(HBV)核心区或表面抗原编码区的siRNA表达载体pSI-C和pSI-S,在体外HBV复制细胞模型中观察对HBV复制和表达的影响.将pSI-C,pSI-S与1.3倍HBV真核表达质粒pHBV共转染HepG2细胞,分别在转染后24,48和72h,观察pSI-C和pSI-S对细胞上清和胞内病毒抗原表达的影响,并用分子杂交方法从病毒复制、转录和翻译水平检测目的基因的表达情况.实验结果表明,pSI-C及pSI-S能明显抑制细胞内HBsAg和HBcAg的合成,呈序列特异性和剂量依赖性的特点,而对照组siRNA无抑制作用.pSI-C比pSI-S抑制作用更强,转染后第2天对HBsAg和HBeAg抑制率达高峰,分别为92%和85%.Southern和Northern杂交结果表明,HBVsiRNA能降低目的基因转录和病毒复制中间体的表达水平,提示针对乙型肝炎病毒核心区和表面抗原编码区的siRNA能有效抑制HBVRNA分子转录和病毒复制,最终降低病毒抗原表达,这为运用RNAi技术进行HBV基因治疗提供了新的思路.
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