改良PCR-RFLP法测定异质性线粒体基因的相对含量  

Modified PCR-RFLP determination of relative content of heterogenous mitochondrial gene

作　　者：龙建纲[1] 王洁[1] 缪明永[1] 王学敏[1] 

机构地区：[1]第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海200433

出　　处：《第二军医大学学报》2004年第9期1036-1037,共2页Academic Journal of Second Military Medical University

基　　金：国家自然科学基金 (30 1 71 0 30 )

摘　　要：目的 :改进 PCR- RFL P法 ,确认线粒体异质性基因并测定异质性线粒体基因的相对含量。方法 :依据先期实验中克隆测序得到的 ECV 30 4细胞中线粒体基因 (D- L OOP区 )多态性位点 ,采用两轮 PCR法 ,以第 1轮 PCR胶回收产物为模板 ,作第 2轮 PCR,并在第 2轮 PCR中引入限制性内切酶位点 ,酶切产物行琼脂糖电泳 ,测定异质性线粒体基因的相对含量。结果 :ECV30 4细胞中存在 5 13A/ G异质性 ,二者比例约为 1∶ 3。 结论 :确证 ECV30 4细胞中含有 5 13A/ G异质性碱基 ,改良 PCR-RFL P法测定异质性线粒体基因相对含量较为简单可靠 。

关 键 词：线粒体 基因 异质性 PCR-RFLP 

分 类 号：Q781[生物学—分子生物学]