小麦锌指蛋白基因的克隆、序列与表达分析(英文)  

Cloning,Sequence and Expression Analysis of a Zinc Finger Protein Gene in Wheat

作　　者：万平[1] 令利军[2] 周文娟[1] 张文俊[1] 凌宏清[1] 朱立煌[1] 张相岐[1] 

机构地区：[1]中国科学院遗传和发育生物学研究所,北京100101 [2]甘肃省农业科学院,兰州730070

出　　处：《Acta Genetica Sinica》2004年第9期895-900,共6页

基　　金：国家转基因植物研究与产业化专项 (编号 :J0 0 -A -0 0 2 );国家"863"计划 (编号 :2 0 0 1AA2 2 2 0 91);中国科学院知识创新工程重要方向项目 (编号 :KSCX2 -1-0 1)资助~~

摘　　要：根据R基因及其调控基因保守序列设计简并性引物 ,对白粉菌接种和未接种处理的一对抗病和感病的小麦 黑麦等位突变易位系TAM10 4R和TAM10 4S总RNA进行RT PCR扩增 ,得到一个诱导表达的cDNA片段。序列分析表明 ,该片段全长 2 4 74bp ,其中含有一个 82 2bp的完整开放阅读框 ,推测其编码一个有 2 73个氨基酸残基、分子量约 31kD的蛋白质分子。蛋白质的氨基酸序列比对显示 ,该蛋白质分子具有C2 HC锌结合motifCX2CX4HX4C结构和锌指domain ,可见克隆的cDNA是一个锌指蛋白基因 ,命名为TaZF。Southern杂交表明 ,TaZF在抗病易位系TAM10 4R的基因组中是多拷贝的。半定量RT PCR分析显示 ,TaZF基因属组成型表达、但受白粉菌诱导表达上调的基因 ,推测其与白粉病菌的侵染过程相关。基因组DNA专化扩增、克隆和测序揭示TaZF基因无内含子。Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction(RT-PCR) was performed on total RNA of resistant-line TAM104R and susceptible-line TAM104S using 33 primers designed according to conservative domain of plant R-genes and the sequence of barley powdery mildew resistance genes Mlo,Mla1,Mla6 and wheat leaf rust resistance gene Lrk10.A polymorphic cDNA fragment TaZF was cloned and sequenced.The Open Reading Frame (ORF) of TaZF is comprised of 822 base pairs which encodes a zinc finger-like DNA or RNA-binding protein with 273 amino acids and molecular weight of 31 kD. TaZF is more than one copy gene in TAM104R genome based on southern blot.It is constitutively expressed,but level of expression was enhanced in tissue infected by Erysiphe Graminis .There is no intron in TaZF genome DNA.

关 键 词：小麦 锌指蛋白 基因克隆 序列分析 表达 

分 类 号：S512.1[农业科学—作物学]