大型纤毛虫总RNA的提取方法  

Total RNA Extraction from Large Ciliates

作　　者：刘星吟[1] 毛永真[1] 陈建欢[1] 李甘霖[2] 金立培[1] 

机构地区：[1]中山大学生命科学学院,广州510275 [2]香港理工大学生化应用系

出　　处：《动物学杂志》2004年第5期44-47,共4页Chinese Journal of Zoology

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (No .30 370 2 10 )

摘　　要：以冠突伪尾柱虫为材料 ,建立了一种适合于富含RNase和多糖的大型纤毛虫总RNA的提取方法。该方法采用异硫氰酸胍和 β 巯基乙醇联合快速变性 ,酚、氯仿和异戊醇抽提 ,同时在变性剂存在的条件下两次选择性地沉淀RNA ,从而有效地去除了DNA、蛋白质和多糖。所得RNA样品经电泳、紫外分光光度法检测和RT PCR分析 ,证实为完整、均一且无基因组污染的总RNA。这为构建冠突伪尾柱虫有小核系与无小核系之间的削减文库、筛选两细胞系差异表达的基因奠定了基础。The method for total RNA isolation from Pseudourostyla cristata was established using guanidinium isothiocyante, β-mercaptoethanol for denaturing, and water-sature phenol, chloroform and isoamyalcohole for extracting. The integrity and purification of the isolated total RNA were detected by using gel electrophoresis,RT-PCR and UV spectrophotometer. The quantity and quality of the total RNA extracted by this method is high enough for construct cDNA subtraction library and screen differential expressed genes.

关 键 词：大型纤毛虫 冠突伪尾柱虫 RNA提取 

分 类 号：Q503[生物学—生物化学]