几种培养方法对ES/GFP小鼠胚胎干细胞系增殖和分化能力作用比较  

Comparison of methods for culturing mouse embryonic stem cell line ES/GFP and its effect on cell proliferation and differentiation

作　　者：曹娟[1] 徐海伟[1] 唐军[1] 范晓棠[2] 吴旋[1] 

机构地区：[1]第三军医大学基础医学部生理学教研室,重庆400038 [2]第三军医大学基础医学部神经生物学教研室,重庆市神经科学研究所,重庆400038

出　　处：《第三军医大学学报》2004年第19期1775-1777,共3页Journal of Third Military Medical University

基　　金：国家自然科学基金资助项目 ( 3990 0 16 9;30 0 70 72 7;30 10 0 0 87) ;全军医学科研"十五"计划青年基金资助项目 ( 0 1Q0 99) ;重庆市应用基础基金资助项目 ( 2 0 0 1)~~

摘　　要：目的　观察采用不同的饲养层和培养基对永久表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞系ES/GFP的增殖、分化和绿色荧光蛋白表达的影响。方法　分别采用小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层 ,采用含重组人白血病抑制因子的DMEM/FCS培养基和Buffalo条件培养基培养ES/GFP细胞系。N2 无血清培养基诱导ES/GFP小鼠胚胎干细胞为神经前体细胞 ,Nestin免疫组化染色。结果　小鼠胚胎成纤维细胞和人胚胎成纤维细胞为饲养层 ,常规LIF培养液和Buffalo条件培养基均能较好维持ES/GFP细胞的高增殖能力和全能分化能力 ,对绿色荧光蛋白的表达和胚体形成、神经前体细胞的分化无明显差异。结论　人胚胎成纤维细胞可替代小鼠胚胎成纤维细胞作为ES/GFP饲养层 ,减少饲养层制备的工作量和污染的机会。Buffalo条件培养基可完全替代LIF培养基 ,降低细胞培养的成本。

关 键 词：干细胞 ES 饲养层 分化 增殖 表达 小鼠胚胎 GFP 人胚胎成纤维细胞 条件培养基 

分 类 号：R329[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] Q813.7[医药卫生—基础医学]