副溶血弧菌TDH基因的克隆与表达  

作　　者：季慧峰[1] 倪培华[2] 吴洁敏[2] 

机构地区：[1]上海第二医科大学附属宝钢医院检验科,上海201900 [2]上海第二医科大学附属瑞金医院检验系,上海200025

出　　处：《检验医学》2004年第6期563-565,共3页Laboratory Medicine

摘　　要：目的　对副溶血弧菌TDH基因进行克隆、鉴定与表达 ,为制备单抗、诊断试剂及进一步深入研究TDH的功能奠定基础。方法　用聚合酶链反应 (PCR)扩增TDH基因将扩增的产物连接于测序载体 pGEM T上 ,经测序反应确定无误后 ,再将PCR产物与原核表达载体 pQE10 0构建表达TDH的重组质粒 ,将重组质粒先转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒 ,经双酶切鉴定后 ,再转化入表达宿主大肠杆菌BL2 1菌株内 ,对转化菌株进行诱导后 ,破菌 ,进行SDS PAGE电泳。结果　电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白 ,其表达的蛋白质相对分子质量为 2 4 0 0 0。结论　TDH基因成功克隆到表达质粒内并表达 ,为制备单抗、诊断试剂与其致病机制研究奠定了基础。

关 键 词：副溶血弧菌 TDH基因 克隆 表达 大肠杆菌 

分 类 号：R378.3[医药卫生—病原生物学]