鸟氨酸脱羧酶基因反义RNA对前列腺癌细胞生长的抑制作用  

Inhibition of Prostate Cancer Cells with Antisense RNA of Ornithine Decarboxylase Gene

作　　者：张岩[1] 刘贤锡[1] 张冰[1] 胡海燕[1] 龚磊[1] 

机构地区：[1]山东大学医学院医学分子生物学实验中心,济南250012

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》2005年第1期128-133,共6页Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology

基　　金：山东省科技厅科研基金和山东省卫生厅科研基金资助 (No .2 0 0 1CA1CAA3 )~~

摘　　要：为研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因反义RNA对前列腺癌细胞的生长抑制作用 ,将表达ODC第 3外显子反义RNA的重组腺病毒rAd ODC Ex3as分别感染前列腺癌细胞株PC 3和LNCap .通过MTT法观察其对前列腺癌细胞增殖的影响 ,并确定不同细胞合适的感染滴度 ,再采用Western印迹和流式细胞术检测rAd ODC Ex3as对细胞中ODC表达的抑制作用、对细胞周期和凋亡的影响以及与CDK抑制物p2 1的关系 .实验显示 ,rAd ODC Ex3as分别以 5 0MOI、2 5MOI感染PC 3和LNCap细胞可明显抑制其生长增殖 ,而不引起细胞毒性作用 ;其对两种细胞中ODC表达的抑制作用分别为4 5 %和 5 9% .流式细胞DNA含量分析证实 ,rAd ODC Ex3as可引起PC 3和LNCap细胞周期G1期阻滞 ,但并未引起凋亡 .通过Western印迹发现 ,细胞中ODC表达的降低可诱导p2 1蛋白的过表达 .结果表明 ,rAd ODC Ex3as在体外能有效地干扰ODC基因的表达 ,并通过诱导p2 1的过表达使其细胞周期停于G1期 ,从而抑制前列腺癌细胞PC 3和LNCap的增殖 ,为其进一步基因治疗的研究打下基础 .To investigate the effect of antisense RNA of the third extron of ornithine decarboxylase ( ODC) gene on prostate cancer cells PC 3 and LNCap, both cells were infected with rAd ODC/Ex3as. MTT assay showed that rAd ODC/Ex3as could significantly inhibit the growth of PC 3 and LNCap cells by 50 MOI and 25 MOI without cell toxicity. Using Western blotting, it was found that 45% and 59% of ODC protein expression were inhibited in PC 3 and LNCap cells, and the decreased ODC expression could further induce the overexpression of CDKi p21. Cell flow cytometry analysis showed that rAd ODC/Ex3as could lead the infected cell to arrest at G1 phase. rAd ODC/Ex3as could interfere with ODC expression, induce G 1 arrest by p21 overexpression and inhibit growth of PC 3 and LNCap cells.

关 键 词：鸟氨酸脱羧酶 腺病毒 基因治疗 反义RNA 前列腺癌细胞 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]