固相时间分辨荧光免疫标记技术研究  

Study of Solid-Phase Time-Resolved Fluorescence Label Immunoassay

作　　者：潘利华[1] 周誓红[1] 孙文伟[2] 谢文兵[1] 赵超[1] 

机构地区：[1]中国科学院长春应用化学研究所,国家电化学光谱分析研究中心,中国科学院稀土化学和物理开放实验室,吉林长春130022 [2]吉林大学中日联谊医院,吉林长春130031

出　　处：《光谱学与光谱分析》2004年第12期1601-1604,共4页Spectroscopy and Spectral Analysis

基　　金：国家自然科学基金 (30 0 70 71 4 )资助项目

摘　　要：通过固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 4 ,7 二氯磺基苯 1,10菲罗啉 2 ,9 二羧酸标记抗 乙型肝炎表面抗体 (HBsAb)IgG实验 ,对于BCPDA标记蛋白质的方法进行了研究。结果表明 :BCPDA在相对温和条件下能与蛋白质反应 ,反应后蛋白质的相对生物活性高于 78% ,标记比为 2 3～ 5 5 ,蛋白回收率达6 0 %以上。在一定条件下与铕离子形成稳定的BCPDA Eu3 + (HBsAb)IgG标记物。利用自建的分析方法 ,测定了标记过程的有关参数。并对标记物的某些光学特性进行了研究。This paper describes optimal conditions for HBsAbIgG labeling with a new fluorescence probe, 4, 7-bis-chorosulfophenyl-1, 10-phenanthroline-2,9-dicarboxylic acid(BCPDA)for the solid phase time-resolved fluorimmunoassay (TRFIA). The result of experiment under states clearly that BCPDA may react with protein under relative mild condition. The relative bioactivity of reacted protein was more than 80%. The labeling molar ratio of BCPDA for HBsAbIgG was 45-70. The recovery was higher than 80%. Protein-BCPDA-Eu3+ complex is stable. It can emit very high fluorescence intensity with very long fluorescence life times. The fluorescence of Protein-BCPDA-Eu3+ complex has a very large stokes shift (270 nm). The emission band at 611.2 nm is very narrow. The research provides the base for developing non-isotopic immunoassay technique and clinical medical diagnosis.

关 键 词：固相时间分辨荧光免疫标记技术 铕标记 抗-乙型肝炎表面抗体 4 7.二氯磺基苯-1 10菲罗啉-2 9-二羧酸 

分 类 号：R446.6[医药卫生—诊断学]