DTNB标记的肌酸激酶的水解及氰解反应的研究  

作　　者：何飚 王洪睿[1,2] 王希成 周海梦[1,2] 

机构地区：[1]清华大学生物科学与技术系,北京100084 [2]中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室,北京100101

出　　处：《中国科学（B辑）》1993年第11期1169-1174,共6页Science in China(Series B)

基　　金：国家自然科学基金

摘　　要：本文研究了DTNB标记的肌酸激酶(S,S′-二-TNB-CK)氰解反应,发现在Degani等人的氰解反应的条件下,同时有水解反应存在。当没有KCN存在时,在pH9.5的条件下,DTNB标记的CK可以迅速地被水解,并释放出TNB基团。水解反应呈双相的一级反应,在快相反应中每个酶分子大约释放一个TNB基团。当水解后的产物进一步与KCN反应时,每个酶分子大约又释放一个TNB基团,反应则呈单相的一级反应。上述结果表明在DTNB修饰酶中,两个被修饰的巯基分别处于二聚体肌酸激酶的每一个亚基的活性部位上,其中一个TNB基团在水解反应中迅速被释放出来而另一个以很慢的速度反应并很难反应完全。而水解产物进行氰解时,那个很难被水解的TNB基团此时被释放出来。这表明了肌酸激酶的两个亚基结合是不对称的,因而导致两个活性部位的巯基处于不同的化学微环境中。此外还发现在水解过程或氰解过程中伴随着TNB基团的释放,活性部位部分巯基被还原成游离巯基,同时活力也得到部分恢复并呈正相关作用。这进一步说明CK中可反应的半胱氨酸巯基是酶的必需基因,并处于酶分子的活性部位上。

关 键 词：肌酸激酶 化学修饰 水解 氰解 

分 类 号：Q556[生物学—生物化学]