抗猪脂肪细胞特异膜蛋白单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定  

Preparation and Characterization of the Specific Monoclonal Antibodies to Porcine Adipocyte Plasma Membrane Protein

作　　者：高士争[1] 张曦[1] 葛长荣[1] 郝军元[2] 汪磊[1] 张玉静[2] 

机构地区：[1]云南农业大学云南省动物营养与饲料重点实验室,云南昆明650201 [2]解放军军需大学军事兽医系,吉林长春130062

出　　处：《中国兽医学报》2005年第2期185-188,共4页Chinese Journal of Veterinary Science

基　　金：云南省自然科学基金重点资助项目(2000C0005Z)

摘　　要：以纯化的猪脂肪细胞特异膜蛋白 (40 0 0 0 )为抗原免疫 BAL B/ c小鼠 ,制备了 2 A3、3 H7和 3 A6等 3株单克隆抗体 ,分别属于 Ig A、Ig M和 Ig G1亚类 ,其最佳稀释倍数分别为 1∶ 1 6 0 0、1∶ 3 2 0 0和 1∶ 6 4 0 0。经 Western blotting鉴定 ,3株单抗均能与 4 0 0 0 0的抗原结合 ,且具有较强的抗原亲和力 ,亲和常数分别为 4 .86× 1 0 8、1 .86× 1 0 9和 2 .4 6× 1 0 9;对皮下脂肪细胞具有很强的特异性 ,经 Western blotting鉴定仅与猪和人脂肪细胞的 4 0 0 0 0膜蛋白发生特异反应 ,而与牛、羊、兔、鸡、鼠等动物的脂肪细胞膜蛋白均无交叉反应 ;能与滇玉、滇昆、滇陆、长撒、长白、DL Y、约长撒和撒坝等品种猪皮下脂肪细胞的 4 0 0 0 0膜蛋白发生特异反应 ,而与皮下脂肪细胞的其他膜蛋白无交叉反应 ;仅与长撒猪皮下脂肪和腹部脂肪细胞的 4 0 0 0 0膜蛋白发生特异反应 ,与心、肝、脾、肺、肾、肌肉。Three monoclonal antibodies(designated 2A3,3H7 and 3A6) of the IgA,IgM and IgG1 subclass against a (40 000) porcine adipocyte plasma membrane protein were raised.The monoclonal antibodies could specifically bind to the (40 000) porcine adipocyte plasma membrane protein and had different binding epitopes.The affinity constants(Ka) were 4.86×10^(8),1.86×10^(9) and 2.46×10^(9),respectively.The three monoclonal antibodies reacted with a species-specific (40 000) protein expressed in porcine and human subcutaneous adipocyte plasma membrane but not with that in cellular membranes of heart,liver,spleen,kidney,lung,skeletal muscle and small intestine and other tested animals such as rat,rabbit,bovine,sheep and chicken.These results demonstrate that the monoclonal antibodies may be applied for controlling fatty deposition in vivo.

关 键 词：脂肪细胞膜蛋白 单克隆抗体 猪 制备 生物学特性 抑制能力 脂肪沉积 

分 类 号：S859.797[农业科学—临床兽医学]