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作 者:吕守芳[1] 张守攻[1] 齐力旺[1] 孙晓梅[1] 王建华[1]
机构地区:[1]中国林业科学研究院林业研究所,北京100091
出 处:《林业科学》2005年第2期48-52,i001,共6页Scientia Silvae Sinicae
基 金:国家高技术研究发展计划 ( 863 )项目 ( 2 0 0 1AA2 44 0 2 1)
摘 要:日本落叶松日永 10、日永 6 9和日草 34三个优株 ,将其未成熟种子和成熟种子的胚及成熟种子萌发的胚根、胚轴和绿色愈伤组织 5种外植体进行体细胞胚胎发生的试验 ,其中只有未成熟胚诱导出胚性愈伤组织 ,筛选出1)胚性愈伤组织诱导培养基 :S培养基 +6_BA 0 5mg·L- 1 +KT 0 5mg·L- 1 +2 ,4_D 1 0mg·L- 1 ;2 )胚性愈伤组织保持与增殖培养基 :S培养基 +6_BA 0 2 5mg·L- 1 +KT 0 2 5mg·L- 1 +2 ,4_D 0 1mg·L- 1 ;3)成熟体细胞胚诱导培养基 :S培养基 +ABA 15mg·L- 1 +PEG4 0 0 0 10 0g·L- 1 。以上 3种培养基均需附加蔗糖 30g·L- 1 ,谷氨酰胺 4 5 0mg·L- 1 ,水解酪蛋白 5 0 0mg·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。 4 )体细胞胚萌发培养基 :S培养基 ,不加任何激素 ,附加蔗糖 2 5g·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。Embryogenic cultures were initiated from immature zygotic embryos of Larix kaempferi on S culture medium containing 6_BA 0.5 mg·L -1, KT 0.5 mg·L -1 and 2,4_D 1.0 mg·L -1.Embryogenic callus were subcultured and multiplicated on S culture medium containing dropping off each hormone concentration, 6_BA 0.25 mg·L -1, KT 0.25 mg·L -1 and 2,4_D 0.1 mg·L -1.We set up 3 steady-going embryogenic cell lines, such as ‘riyong10',‘riyong 69',‘ricao 34'.Somatic embryos obtained on S culture medium with ABA 15 mg·L -1 and PEG 4000 100 g ·L -1. These three culture media were added glutamine 450 mg·L -1, casein hydrolysate 500 mg·L -1, sucrose 30 g·L -1 and gellan gum 3 g·L -1 (Sigma #),pH5.8.Mature somatic embryos can germinate and develop further into plantlets when they are isolated and cultured on a hormone-free S culture medium adding sucrose 25 g·L -1 and gellan gum 3 g·L -1 (Sigma #),pH5.8.
关 键 词:体细胞胚胎发生 日本落叶松 胚性愈伤组织 诱导培养基 成熟种子 增殖培养基 水解酪蛋白 种子萌发 未成熟胚 谷氨酰胺 外植体 蔗糖 凝胶 优株 胚根
分 类 号:S791.223[农业科学—林木遗传育种] Q943.1[农业科学—林学]
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