沙棘属植物RAPD-PCR反应条件的优化  

Optimization of RAPD-PCR reaction conditions of the genus Hippophae

作　　者：张辉[1] 张建清[1] 苏雪[1] 张超强[1] 杜斌[1] 

机构地区：[1]西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州730070

出　　处：《西北师范大学学报（自然科学版）》2005年第3期63-66,共4页Journal of Northwest Normal University(Natural Science)

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30270091);甘肃省教育厅科研项目(041-18)

摘　　要：采用L16(45)正交试验设计研究了沙棘属植物RAPDPCR反应中DNA模板浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度和Taq酶含量等5个因素对于PCR扩增效果的影响,并对照温度梯度探讨了退火温度等热循环参数,确定适合沙棘属植物的最佳扩增体系为:模板DNA1.0mg·L-1,引物3.0μmol·L-1,dNTPs0.1mmol·L-1,Mg2+2.5mmol·L-1,Taq聚合酶8.33～16.67nkat;扩增程序中最适退火温度为35～36℃.By applying L_(16)(4~5) orthogonal experiment, five essential factors that might affect the result of RAPD are compared and optimized. The comparison shows that the optimal condition of five factors in RAPD-PCR reaction system is template DNA 1.0 mg·L^(-1),random primer 3.0 μmol·L^(-1),dNTPs 0.1 mmol·L^(-1),Mg^(2+) 2.5 mmol·L^(-1) and Taq polymerase 8.33~16.67 nkat.35~36 ℃ is regarded as the optimal annealing temperature in amplification procedures.

关 键 词：沙棘 RAPD 体系优化 

分 类 号：Q946.33[生物学—植物学]