人肥胖基因在大肠杆菌中的表达  

Expression of human obese gene in E.coli

作　　者：昔奋攻 [1] 李宁 [1] 吴常信 [2] 

机构地区：[1]中国农业大学生物学院,农业生物技术国家重点实验室,北京,100094 [2]中国农业大学动物科技学院,北京,100094

出　　处：《高技术通讯》2005年第4期63-66,共4页Chinese High Technology Letters

基　　金：国家自然科学基金

摘　　要：肥胖基因编码的瘦蛋白可以反映机体脂肪含量信息,在发育、繁殖、造血及体重调节等方面具有重要功能.本文利用PCR方法扩增去除信号肽的人肥胖基因cDNA序列,并将位于基因5'端的CCC转变为大肠杆菌常用密码子CCG,扩增片段经测序证实后,克隆原核表达载体pT7-7,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经温度诱导,SDS-PAGE电泳可见分子量约为16kD的特异蛋白表达带,表达量最高占菌体蛋白总含量的45%以上.表达重组蛋白经纯化,注射昆明白小白鼠,小白鼠体重明显下降,说明纯化的重组蛋白具有生物学活性.

关 键 词：大肠杆菌 肥胖基因 SDS-PAGE电泳 CDNA序列 原核表达载体 重组蛋白 PCR方法 生物学活性 脂肪含量 基因编码 扩增片段 质粒转化 温度诱导 蛋白表达 菌体蛋白 小白鼠 瘦蛋白 信号肽 CCG 密码子 CCC 分子量 表达量 纯化 造血 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学] S813.1[农业科学—畜牧学]