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作 者:王莉[1] 霍艳英[1] 张开泰[1] 王莹[1] 项晓琼[1] 胡迎春[1] 余刚[2] 李刚[1] 米粲[3] 吴德昌[1]
机构地区:[1]军事医学科学院放射医学研究所,北京100850 [2]重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆400016 [3]重庆医科大学病理学教研室,重庆400016
出 处:《生物技术通讯》2005年第2期128-130,共3页Letters in Biotechnology
基 金:国家自然科学基金项目(30200329)
摘 要:研究人永生化支气管上皮BEP2D细胞中,作为Smad蛋白家族的抑制分子,Smad7对TGF-β信号通路中Smad2、Smad3、Smad4核转位的抑制作用。培养BEP2D细胞,瞬时转染Smad7真核表达载体pCISmad7.neo,TGF-β刺激,提取细胞核蛋白及总蛋白,用Westernblot方法比较瞬时转染Smad7基因前后细胞核中Smad2、Smad3、Smad4蛋白表达的差异。结果,Smad3在TGF-b作用下有明显的核转位;转染Smad7后Smad3、Smad4的核转位显著受到抑制。表明在BEP2D细胞中,Smad7对TGF-β/Smads信号通路的拮抗作用主要通过抑制Smad3的活化、Smad3/Smad4异源复合物的形成及核转位,从而拮抗TGF-β对细胞的生长抑制效应。To analyze the effect of Smad7 gene on nuclear translocation of Smad2/3/4 in the immortalized human bronchial epithelial cells BEP2D. Transient transfect full-length Smad7 cDNA construct pCISmad7.neo into BEP2D cells, cell nuclear protein and total protein were extracted, then perform Western blot to examine the expression level of Smad2, Smad3 and Smad4. In BEP2D cells, Smad3 has evident nuclear translocation with stimulated by TGF-β. The nuclear translocation of Smad3 and Smad4 has been inhibited after transfect of pCISmad7.neo. Smad7 negatively regulates TGF-β/Smads signaling through blocking the phosphorylation of Smad3, the formation of Smad3/Smad4 heterogenetic complexes and nuclear translocation.
关 键 词:SMAD7 SMAD2 SMAD3 SMAD4 核转位 抑制作用 转化生长因子-β 信号转导通路 支气管上皮细胞
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