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作 者:万家余[1] 张玉静[1] 张蕾[1] 韩烨[1] 高建邦[1] 孙博兴[1] 肖安东[1]
出 处:《中国兽医学报》2005年第3期273-275,共3页Chinese Journal of Veterinary Science
基 金:国家自然科学基金资助项目(30471284)
摘 要:为探讨HBV/HAV复合疫苗的可行性,利用DNA重组技术将HBsAg与HAW复合多表位抗原基因VPX进行融合,插入到真核表达质粒pVAX1多克隆位点,构建成核酸表达疫苗pVAX1/SVPX,将其转染CHO细胞。转染细胞培养48h后,进行RT-PCR、Western-blot、ELISA分析,结果表明HBV/HAV复合抗原基因SVPX能够在CHO细胞内转录、表达,融合蛋白具有HBV和HAV抗原的特性。In order to explore the possibility of developing a HBV/HAV combined gene vaccine,a multi-epitope antigen gene VPX of HAV was fused with HBsAg gene and SVPX gene was constructed.SVPX was sub-cloned into an eukaryotic expression plasmid pVAX1 to construct the eukaryotic recombinant expression plasmid pVAX1/SVPX.The identified recombinant was then transfected into CHO cells with liposome mediated method.The transfected cells was tested by RT-PCR,Western-blot,ELISA method 48 hours after culture.The results showed that the multi-eptitope gene SVPX can be transcripted and expressed,and expressed fused protein could react with HAV and HBV antisera.
关 键 词:CHO细胞 抗原基因 HBV WESTERN-BLOT DNA重组技术 真核表达质粒 HBsAg 多克隆位点 ELISA 复合疫苗 细胞培养 融合蛋白 多表位 细胞内 转染
分 类 号:S858.28[农业科学—临床兽医学] Q78[农业科学—兽医学]
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