体外转录过程中遇到的问题及探讨  

PROBLEMS AND ANALYSIS IN VITRO TRANSCRIPTIN

作　　者：袁红梅[1] 陶雷[1] 赵丽娟[1] 王同昌[1] 

机构地区：[1]哈尔滨师范大学

出　　处：《哈尔滨师范大学自然科学学报》2005年第3期90-92,共3页Natural Science Journal of Harbin Normal University

摘　　要：人们在做原位杂交、southemblots或northemblots时,RNA探针比DNA探针稳定且特异性强[1],产生的讯号比DNA探针强约10倍,因此通常RNA探针成为实验者的首选.本人在用SP6RNA聚合酶体外转录合成史氏鲟B-actin基因的RNA探针时,转录产物电泳后出现四条带,分别位于模板的上端和下端.为了探究其中的原因,本人选择了可能影响转录产物长度的几个因素(RNA聚合酶、模板具有3′-凸头以及模板的长度)分别设计实验进行分析,结果发现不同的RNA聚合酶以及模板过短可能形成自连等都有可能影响转录产物的结果.The sensitivity of RNA probe is about ten times higher than that of DNA probe in situ hybridization, southern blots of northern blots, so RNA probe is prior to be chosen. The transcript has four bands in gel electrophoresis as B-actin RNA probe of Amur Sturgeon is synthesized by SP6 RNA polymerase. I analyse some factors and find that RNA polymerase and the length of templates may affect the transcription resμLts.

关 键 词：体外转录 RNA聚合酶 RNA探针 northem DNA探针 转录产物 可能影响 原位杂交 设计实验 模板 特异性 n基因 史氏鲟 长度 电泳 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学] Q756