氯化钴对PC12细胞的凋亡作用  

Apoptotic effect of cobalt chloride on PC12 cells

作　　者：曾季平[1] 王立祥[2] 胡晓燕[1] 于清水[1] 秦文[3] 崔行[1] 

机构地区：[1]山东大学医学院生化与分子生物学研究所,山东济南250012 [2]山东大学医学院药理学研究所 [3]山东大学医学院西校区医院

出　　处：《毒理学杂志》2005年第2期105-107,共3页Journal of Toxicology

基　　金：山东省自然科学基金项目 (Y2 0 0 0C1 5)

摘　　要：目的　确定氯化钴(CoCl2 )对PC12细胞的影响。方法　构建CoCl2 诱导的PC12细胞模型,检测CoCl2 对PC12细胞的毒性作用;将Caspases的抑制基因p3 5转染PC12细胞得到可稳定表达p3 5基因的细胞株PC12 p3 5 ,检测p3 5对CoCl2 诱导的PC12细胞的作用;检测Caspases特异性多肽抑制剂Z VAD FMK对CoCl2 诱导的PC12细胞的作用。结果　分别以10 0、3 0 0、5 0 0、70 0和10 0 0 μmol LCoCl2 诱导PC12细胞2 4h或以5 0 0 μmol LCoCl2 分别诱导PC12细胞12、2 4、3 6、48和60h后,PC12细胞存活率均明显下降(P <0 0 1) ,并与CoCl2 诱导的时间和浓度呈正相关;细胞亚显微结构检测,流式细胞分析和DNA片段化结果也表明5 0 0 μmol LCoCl2 诱导PC12细胞2 4h可使PC12细胞出现明显凋亡特征。构建可稳定表达Caspase蛋白酶抑制基因p3 5的PC12细胞株,或分别加入5 0和10 0 μmol LCaspases多肽抑制剂Z VAD FMK预处理PC12细胞1h后,以5 0 0 μmol LCoCl2 诱导PC12细胞2 4h ,形态学观察结果,细胞存活率检测和流式细胞分析均表明p3 5基因和Z VAD FMK均可有效地抑制CoCl2 诱导的PC12细胞凋亡(P <0 0 1)。结论　CoCl2 可诱导PC12细胞凋亡。Objective To identify the effect of cobalt chloride (CoCl_2) on PC12 cells.Method The model that CoCl_2 induce apoptosis in PC12 cells was generated.PC12 cells that stable expressed the Caspases inhibitor gene p35 was generated and the effect of p35 and Z-VAD-FMK on the process of apoptosis induced by CoCl_2 was analyzed.Results PC12 cells triggered by 100,300,500,700 and 1 000 μmol CoCl_2 for 24 h or 500 μmol CoCl_2 for 12,24,36,48 and 60 h could both appear apoptosis in a dose and time-dependent manner (P<0.01). Electron microscope observation, flow cytometric analysis and DNA fragmentation could also identify the significant apoptosis in PC12 cells after induction by 500 μmol CoCl_2 for 24 h. The p35 gene and Z-VAD-FMK could significantly block the apoptosis induced by 500 μmol CoCl_2 for 24 h (P<0.01).Conclusion CoCl_2 can induce PC12 cells apoptosis.

关 键 词：氯化钴 凋亡作用 Caspases PC12细胞凋亡 Caspase蛋白酶 Z-VAD-FMK CoCl2 流式细胞分析 PC12细胞株 P35基因 细胞存活率 DNA片段化 稳定表达 抑制基因 特异性多肽 亚显微结构 mol/L 500 24h 细胞模型 毒性作用 观察结果 

分 类 号：R988.1[医药卫生—药品] R995[医药卫生—药学]