人白细胞介素-2在大肠杆菌高效表达及其纯化与鉴定  

作　　者：虞建良 范佩芳[1] 郑宏大[1] 孙兰英[1] 王子轩[1] 郑仲承[1] 李伯良[1] 陈寅[1] 唐建伟[1] 刘新垣[1] 

机构地区：[1]中国科学院上海生物化学研究所,上海200031

出　　处：《中国科学（B辑）》1995年第10期1063-1070,共8页Science in China(Series B)

摘　　要：研究了各种因素对IL-2表达的影响,发现(1)在本工作的条件下,消除IL-2基因3′端的部分非翻译区,能提高IL-2的表达效率;(2)IL-2基因终止密码子与终止信号间的距离对表达有影响,增加此距离(D)会大大降低IL-2表达效率;(3)启动子P_L与P_R串联与否对表达效率无关重要,即带P_R cIts857 P_L元件与带clts857 P_R P_L元件对表达IL-2的效率基本一致;(4)目的基因与选择基因的表达方向对表达IL-2的效率也无影响。在此基础上构建了高效表达的质粒(pLY-4),由它产生的IL-2达到菌体总蛋白的30％～40％,表达γ-干扰素时,可达60％～80％。还建立了简易迅速纯化IL-2的方法,分离包涵体后可达80％纯度,以后再用一步分子筛柱层析即可得到95％以上纯品。

关 键 词：人白细胞介素-2 大肠杆菌 基因表达 

分 类 号：R392.2[医药卫生—免疫学]