麂属动物陈旧皮张标本的DNA提取及PCR扩增  

PCR ANALYSIS OF DNA FROM FUR SPECIMENS OF MUNTJACS(Muntiacus)

作　　者：兰宏[1] 王文[1] 施立明[1] 

机构地区：[1]中国科学院昆明动物研究所细胞与分子进化开放研究实验室

出　　处：《Zoological Research》1995年第2期146-152,共7页动物学研究（英文）

基　　金：中国科学院"八五"重点课题;1992年国际野生生物保护学会中国西南地区青年野外考察基金

摘　　要：本实验用改进的方法从保存于标本馆的动物皮张标本中提取ＤＮＡ，所得ＤＮＡ片段的分子量从１００ｂｎ到１ｋｂ以上。利用线粒体ＤＮＡ细胞色素ｂ通用引物和ＰＣＲ技术，从小麂、印度麂、贡山麂、费氏麂、黑麂ＤＮＡ中扩增出３０７ｂｐ的细胞色素ｂ特异片段（加上两端引物后长度为３６４ｂｐ）。用２８种限制性内切酶对从新鲜血样和从陈旧皮张标本中所得扩增片段进行酶切分析，发现只有４个酶（ＤｒａⅠ、ＸｂａⅠ、ＨａｅⅢ、ＨｐｅⅡ）在这个片段上有切点，其中ＨａｅⅢ和ＨａｐⅡ的识别位点在各种麂中有所不同。The DNAs were extracted from both fresh sample and fur specimens of the Indian muntjac (M. muntjak), the Chinese muntjac (M. reevesi), the black muntjac (M. crinifrons), Fea's muntjac (M. feae), and the Gongshan muntjac (M. gongshanensis). For the fur specimens, DNAs of over 1.0 kilobase pair(kb) were obtained.Polymerase Chain Reactions(PCR) were performed for these DNAs using a pair of universal primers localized in cytochrome b gene of animal mitochondrial DNA. Fragments of about 360 base pair (bp) in size werc detected by 1.5% agarose gel electrophoresis. We used 28 restriction endonucleases to digest the amplified fragments and found some polymorphic sites among mtDNA of muntjacs.

关 键 词：麂 皮张标本 DNA 提取 聚合酶链反应 

分 类 号：Q959.842[生物学—动物学]