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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:谭周进[1] 谢丙炎[2] 肖启明[3] 杨宇红[2] 冯兰香[2]
机构地区:[1]湖南农业大学食品科技学院,长沙410128 [2]中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081 [3]湖南农业大学生物安全科技学院,长沙410128
出 处:《微生物学通报》2005年第4期57-61,共5页Microbiology China
基 金:国家重点基础研究发展规划项目(No.2002CB111400)
摘 要:为了获得较多的GroEL蛋白,深入研究其性质,对烟粉虱内共生菌groEL基因表达的条件进行了研究.结果表明:诱导groEL基因原核表达的最佳IPTG浓度为100μmol/L;在35℃诱导培养,能够获得较高的蛋白表达量;最佳诱导培养时间为4~5h;最佳诱导培养的初始pH值为8.0;在振荡转速为120r/min、诱导培养时间为4~5h时,增大接种量,有利于原核基因的表达;添加少量的NH4+有利于提高groEL基因原核表达的量,但Ca2+、Fe3+、K+、Mg2+则抑制groEL基因的原核表达,其中Fe3+抑制作用最为强烈;NH4+含量过高也不利于groEL基因原核表达;在培养基中添加少量的葡萄糖,能够提高groEL基因原核表达,但葡萄糖含量较高时不利于groEL基因原核表达.The study on prokaryotic expression conditions of groEL from endosymbiont in B. tabaci was conducted. The results showed that: The optimal IPTG content for inducing prokaryotic expression of groEL was 100μmol/L When it was induced by IPTG at 35℃, higher GroEL product would be acquired. The optimal induced culturing time for prokaryotic expression of groEL was 4 - 5 hours. Higher inoculated quantity would benefit prokaryotic expression of groEL. A little NH4+ content would improved prokaryotic expression of groEL, but prokaryotic expression of groEL would be inhibit by Ca^2 + , Fe^3 + , K ^+ and Mg^2+ . When low content glucose was added to the LB medium, it would benefit prokaryotic expression of groEL. Prokaryotic expression of groEL would be inhibit by high content glucose.
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