非同位素PCR－SSCP方法的初步临床应用  

作　　者：毛新[1] 黄明生[1] 牟庶华 杨光华[2] 曾仲[3] 赵坡[4] 

机构地区：[1]华西医科大学精神科遗传室 [2]华西医科大学病理科 [3]成都市第三人民医院神经内科 [4]军事医学科学院放射医学研究所

出　　处：《遗传》1995年第4期4-7,共4页Hereditas（Beijing)

基　　金：国家自然科学基金;国家教委博士学科点专顶科研基金

摘　　要：单链构象多态性检测法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）是近年发展起来的一项检测人类基因组突变的新技术。然而，在该技术中需要使用放射性同位素标记的核苷酸或引物，从而限制了其广泛临床研究及诊断方面的应用。本文报告一种改进的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法，该方法不用同位素标记引物，而直接在溴乙啶染色的聚丙烯酰胺凝胶上显示ＳＳＣＰ。用该方法对５５例平滑肌肉瘤ｐ５３基因第７外显子突变的检测表明，３８％的瘤组织ＤＮＡ存在异常的ＳＳＣＰ。其中１０例有ＨａｅⅢ和ＭｓｐＩ酶切位点的突变（１８％），１９例有突变型ｐ５３蛋白的过度表达（９例同时有异常ＳＳＣＰ改变）。而ｐ５３质粒ＤＮＡ，平滑肌瘤及Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病患者基因组ＤＮＡ无ｐ５３基因第７外显子扩增片段的异常ＳＳＣＰ改变。同时，还使用该方法对临床诊断的２０例Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病患者和８例健康对照进行了β－淀粉样蛋白前体基因第１６和１７外显子的扩增及分析，均未发现有异常ＳＳＣＰ改变及ＥｃｏＲＩ，ＢｃｌＩ酶切位点的突变。本研究结果提示，该非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法可靠、敏感、简便、快速，具有潜在的推广价值。

关 键 词：非同位素 PCR-SSCP 临床应用 实验室诊断 

分 类 号：R446.9[医药卫生—诊断学]